Андрей Смирнов
Время чтения: ~15 мин.
Просмотров: 0

Ретикулоциты: что это такое в анализе крови, нормы у взрослых и детей, причины повышения, понижения

Классификация

Ретикулоциты в крови делятся на несколько категорий, которые отличаются по расположению базофильного вещества:

  • ядерные клетки — БВ имеет вид венчика или ядра;
  • клубкообразные частицы — БВ внешне напоминает клубок;
  • полносетчатые клетки — базофильное вещество выражено как густая сетка;
  • неполносетчатые формы — БВ как отдельные нити;
  • пылевидные частицы — базофильная субстанция выражена в мелких зернышках.

Существует фракция незрелых ретикулоцитов, которые имеют собственное обозначение в анализе — IRF. Бывают:

  • низкой флюоресценции или LRF — от 83 до 97 %;
  • средней флюоресценции или MRF — 2,9–15,9 %;
  • высокой флюоресценции или HRF — от 0 до 1,7 %.

Ретикулоциты

Унифицированный метод подсчета количества ретикулоцитов после окраски их бриллиантовым крезиловым синим, азуром I или азуром II непосредственно на стекле или в пробирке (1972).

Принцип.

Суправитальная окраска красителями, выявляющими зернисто-нитчатую субстанцию ретикулоцитов.

Реактивы. Можно использовать один из следующих красителей.

1.Насыщенный раствор бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте (для приготовления абсолютного спирта надо выдержать этанол 96 % в нескольких сменах прокаленного порошка медного купороса). На 100 мл абсолютного спирта берут 1,2 г краски.

2.Раствор азура I, предложенный П. Н. Кориковым: азур 1 — 1 г, аммония оксалат — 0,4 г, натрия хлорид- 0.8 г, этиловый спирт 96 % 10 мл, дистиллированная вода — 90 мл. Раствор краски в закрытом флаконе помещают на 2-3 дня в термостат при 37 °С и периодически энергично взбалтывают. Затем охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр. Раствор сохраняют в посуде из темного стекла. При появлении осадка краску следует снова профильтровать.

3.Раствор азура II следующего состава: азур II 1 г, натрия цитрат 5 г, натрия хлорид, 0,4 г, дистиллированная вода 45 мл. Раствор оставляют в термостате при 37 °С на 2 сут, периодически помешивая. Для ускорения растворения краску можно прогреть на слабом огне в течение 15- 20 мин, не доводя до кипения. Охлаждают до комнатной температуры и фильтрую). Хранят в посуде из темного стекла.

Специальное оборудование. Микроскоп.

Ход определения.

Окраска на стекле.

Хорошо вымытое и обезжиренное предметное стекло подогревают над пламенем горелки. Стеклянной палочкой наносят на стекло каплю одного из красителей и готовят мазок из краски шлифованным стеклом. Маркируют сторону стекла, на которую нанесен мазок краски, стеклографом. В таком виде стекла можно заготовить впрок и хранить в сухом темном месте. Наносят каплю крови на мазок краски, готовят из нее тонкий мазок и тотчас помещают во влажную камеру на 3—4 мин (можно пользоваться чашкой Петри с уложенными по краям валиками смоченной ваты или фильтровальной бумаги). Затем высушивают мазки на воздухе.

В приготовленных таким образом мазках эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция — в синий цвет.

Окраска в пробирке.

Метод 1: перед употреблением готовят в пробирке рабочий раствор бриллиантового крезилового синего из расчета на каплю 1 % раствора оксалата калия 4 капли раствора краски 1. В краску добавляют 0,04 мл крови (две пипетки до метки 0,02)

Смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на 30 мин. Перемешивают и готовят тонкие мазки

Метод 2: в пробирку помещают 0,05 мл раствора краски 3 и 0,2 мл крови. Смесь тщательно перемешивают и оставляют на 20-30 мин. Перемешивают и готовят тонкие мазки.

Метод 3: в пробирку помещают 0,3—0,5 мл раствора краски 2 и 5-6 капель крови пипеткой от аппарата Панченкова

Пробирку накрывают резиновой пробкой, смесь тщательно, но осторожно перемешивают и оставляют на  1-2 часа (лучше окрашиваются ретикулоциты при экспозиции 2-3 ч). Перемешивают и готовят тонкие мазки

Подсчет ретикулоцитов.

В мазках эритроциты окрашены в желтовато-зеленоватый цвет, зернисто-нитчатая субстанция в синий или синевато-фиолетовый цвет.

Приготовленные одним из указанных выше способов мазки микроскопируют с иммерсионным объективом. Необходимо подсчитать не менее 1000 эритроцитов и отметить среди них количество эритроцитов, содержащих зернисто-нитчатую субстанцию. Практически для большей точности пользуются специальным окуляром, в котором можно уменьшить поле зрения до требуемых размеров. При равномерных тонких мазках, в которых эритроциты расположены в один ряд, подбирают такое поле зрения, в котором имеется, например, 50 эритроцитов, и затем просчитывают 20 таких полей зрения.

При отсутствии готового окуляра его можно легко приготовить, для чего отвинчивают окуляр 10Х, вкладывают в него кусок бумаги с вырезанным небольшим квадратиком и завинчивают.

Количество подсчитанных ретикулоцитов выражают на 1000 или на 100 эритроцитов.

Как сдавать

Чтобы получить максимально достоверные результаты исследования, необходим правильный подход со стороны пациента к сдаче материала для анализа и выполнение правил взятия крови со стороны специалиста.

Подготовка

Подготавливаться к обследованию нужно с соблюдением общих рекомендаций. В первую очередь необходимо запомнить, что сдача крови происходит только на голодный желудок. Поэтому минимум за восемь часов до процедуры нужно отказаться от приема пищи. Не запрещается пить воду.

Кроме того, нельзя сдавать кровь после приема каких-либо медикаментозных препаратов. С момента отмены должно пройти не менее 2-3 недель. Если сделать это невозможно, то обязательно необходимо поставить врача в известность о том, какие именно лекарственные средства употребляются, какова их дозировка.

За сутки до проведения анализа рекомендуется снизить к минимуму потребление жареных и жирных блюд, а также отказаться от спиртных напитков и чрезмерных физических нагрузок.

Проведение

Стоит сразу отметить, что общий анализ крови не подразумевает исследование ретикулоцитов. При необходимости его определения врач дополнительно указывает его в направлении.

Иногда проведение анализа кровяной жидкости может проводиться отдельно только на установление количественного ретикулоцитарного показателя.

Определяют концентрацию фермента после взятия крови из пальца или вены.

Процедура представляет собой стандартный процесс и не вызывает сильных болезненных ощущений. Устанавливается уровень телец в мазке крови, для подсчета которых применяются незрелые клетки.

Как рассчитать количество

Для проведения подсчета может применяться один из нескольких способов.

В том случае, когда ферменты окрашиваются на стекле, процесс происходит следующим образом:

  • вначале необходимо нанести специальный краситель;
  • далее мазок кровяной жидкости;
  • стекло помещают в камеру, имеющую повышенную влажность.

Если используется пробирка, то в нее сначала помещают краситель, после этого каплю крови и все хорошо смешивают. В этом случае нужно выдержать смесь в течение определенного времени, после этого еще несколько раз перемешать и сделать мазок.

Интерпретация данных

Расшифровкой результатов занимается исключительно специалист

При этом важно учитывать тот момент, что низкие значения возможны при приеме некоторых лекарственных препаратов: цитостатиков, иммунодепрессантов, антибиотиков, противопаркинсонических и противоэпилептических средств

Причины повышения количества ретикулоцитов (ретикулоцитоза)

  1. Гемолиз, разрушение эритроцитов. Возможные причины гемолиза – воздействие гемотоксинов (яд гадюки, токсины при малярии, некоторые лекарственные препараты для лечения эртремии) и аутоиммунные реакции в отношении эритроцитов. В случае массивной гибели эритроцитов показатель RET может превысить норму на 300%.
  2. Кровотечения. Для дифференциальной диагностики используется RET % в динамике: при недавней острой кровопотере количество ретикулоцитов повышается через 3-4 дня, при хронических кровопотерях уровень RET будет стабильно высоким.
  3. Процессы воспаления, опухоли или метастазы в костном мозге повышают RET %.
  4. Период восстановления после лучевой либо химиотерапии.
  5. При лечении анемии препаратами железа RET % повышается на 8-12 день, при назначении адекватных дозировок вит. В12 – на 5-8 день. В обоих случаях ретикулоцитоз – показатель эффективности терапии.
  6. Полицитемии любого генеза (вместе с подъёмом количества гемоглобина и уровня гематокрита).
  7. Приём эритропоэтина для стимуляции костного мозга при анемии.
  8. Приём жаропонижающих лекарств и леводопа.
  9. Курение.
  10. При подъёме на высоту — адаптация к пониженному содержанию кислорода в воздухе.
  11. При беременности.

Для выяснения причины повышения показателя RET проводят дополнительные исследования: изолированные данные большой роли не играют.

Последствия и лечение ретикулоцитоза

Последствиями повышения RET являются: увеличение гематокрита, количества эритроцитов и вязкости крови. Велика опасность развития тромбозов и перекрытия просвета сосудов в головном мозге, сердце, нижних конечностях. Результатом могут стать инфаркт миокарда, ишемический инсульт, тромбоэмболия лёгочной артерии, отмирание мягких тканей ног. Все эти состояния жизнеопасны, нуждаются в срочном лечении.

  • При острых кровопотерях применяют переливание цельной крови либо её компонентов (плазма, эритроцитарная и тромбоцитарная массы). При хронических кровотечениях в желудочно-кишечном тракте, при циррозе печени занимаются терапией основного заболевания либо оперативным лечением.
  • Токсическое воздействие: инфузионная терапия, противоядия. При аутоиммунных реакциях – плазмаферез.
  • Опухоли и метастазы в костный мозг: применяется лучевая и химиотерапия. При полицитемиях – кровопускания, лекарственная терапия, пересадка костного мозга.

Анализ крови на ретикулоциты

Подсчет ретикулоцитов в мазке крови не обязателен при гематологическом исследовании, но относится к общему клиническому анализу. Только при возникновении определенных подозрений у врача делается специальное обозначение в анализе.

Содержание в крови молодых эритроцитов принято отображать в процентах по отношению к зрелым клеткам, в количественном выражении на 1000 красных клеток (в промилле) либо как ретикулоцитарный индекс. Показатели скорости продукции ретикулоцитов могут ответить на вопрос о состоянии почек и костного мозга, а также об активности процесса разрушения эритроцитов.

Причины исследования

Причины обследования на количество RTC в крови заключаются в необходимости проверить работу костного мозга и почек по производству кровяных клеток и эритропоэтина в таких случаях:

  • при подозрении на анемии различного происхождения;
  • при необходимости контроля медикаментозной терапии дефицита железа, витамина В12 и фолиевой кислоты;
  • для наблюдения при приеме эритропоэтиносодержащих препаратов, эритросупрессоров;
  • при сильных внешних кровотечениях либо подозрении на внутренние;
  • в связи с необходимостью приема препаратов, нейтрализующих токсины в результате укусов ядовитых насекомых или змей;
  • для контроля выработки эритроцитов при пересадке костного мозга либо почки;
  • для определения онкологических заболеваний.

Последний пункт связан с особенностями метастазирования некоторых раковых опухолей в кровеобразующие органы.

Способ выявления

При потере ядра к кровяным клеткам применимы методы окраски только кислыми красителями. Посредством подкрашивания в мазке крови обозначаются элементы эритроидного ряда, которые затем обнаруживаются при помощи световой микроскопии. Для выделения ретикулоцитов из общей массы эритроцитов нужно использовать специальные препараты, меняющие цвет зернистой структуры клеток.

Непосредственно процесс выявления заключается в смешивании кровяной плазмы с бриллиантовым крезиловым синим или акридиновым оранжевым красителем инвитро (в пробирке) либо на стекле в пропорциях: 1 часть крови к 10 частям вещества.

Методы на стекле и инвитро принципиально различаются. В первом случае смешанные мазки крови с красителем на 10 минут опускают во влажную среду, после чего сушат и подсчитываю клетки под микроскопом. Во втором варианте перемешанный в пробирке состав оставляют на срок до 3 часов, затем повторно смешивают, делают мазок и подсчитывают.

Когда звёздчатые клетки ретикулоцитов становятся различимы, и определима степень их зрелости (по структуре подкрашенного БВ) можно получить информацию о состоянии костного мозга.

Ретикулоциты окрашены выявляющими красителями

Норма ретикулоцитов в крови по возрасту и полу: таблица

В зависимости от возраста и половой принадлежности нормы ретикулоцитов крови отличаются (см. таблицу)

Также важно обратить внимание на единицы измерения, они могут быть в процентах (%) и промилле (‰)

Возраст

Количество в %

Количество в ‰

1-2 день

3-7

30-70

3-6 день

1-3

10-30

7-8 день

0-1

0-10

9 день – 5 недель

0,2-2

2-20

5-7 недель

0,3-3,5

3-35

8-10 недель

0,4-4,8

4-48

11-12 недель

0,3-4,2

3-42

13-15 недель

0,3-3,6

3-36

16 неделя – 1 год

0,2-2,8

2-28

С 1 года у мужчин

0,51-1,81

5,1-18,1

С 1 года у женщин

0,5-1,7

5-17

Для взрослых характерна стабильность уровня ретикулоцитов, тогда как для новорожденных и детей до года их содержание в крови постоянно меняется. Это связано с постепенным развитием кроветворных органов – селезенки и костного мозга. Кровь для исследования чаще берут из вены, а современным методом определения является не окрашивание, как ранее, а цитометрия.

Обозначение ретикулоцитов в анализе крови

В результатах анализа крови ретикулоциты обозначаются латинскими буквами RET. При этом всегда указывается общее число эритроцитов – RBC, что в переводе означает красные кровяные тельца. Процентное содержание или промилле незрелых ретикулоцитов будет второй цифрой. Такой тест не входит в общее клиническое исследование крови, на него необходимо отдельное направление.

Как происходит забор крови на ретикулоциты

На ретикулоциты крови забор материала может быть из среднего или безымянного пальца – капиллярная, но в большинстве крупных лабораторий принято брать из вены. Это объясняется более точными результатами диагностики во втором случае.

Подготовка к анализу

Для достоверности итогов обследования при подготовке учитывают:

прием медикаментов – необходимо согласовать отмену тех препаратов, которые могут повлиять на результат, для этого за 3-5 дней важно уточнить применение таблеток и инъекций у врача;
употребление пищи – минимальный перерыв составляет 4 часа, оптимальный – 8-10;
время суток – сдавать кровь нужно утром, до 11 часов;
физические нагрузки – не рекомендуются за сутки;
стрессовые влияния (переживания, волнения) – исключают за день, особенно важно их устранить за 3 часа до взятия крови;
курение – запрещается за час до процедуры.

Подсчет ретикулоцитов в мазке крови

Для подсчета ретикулоцитов кровь смешивают с веществом, которое предотвращает свертывание, и направляют подписанную пробирку в лабораторию. Ранее использовалась методика окраски по Романовскому, или с метиленовым синим.

Незрелые эритроциты отличаются от полноценных наличием остаточных клеточных элементов – митохондрий, нитей ДНК, частей ядра. Это может выглядеть, как сеточка, в переводе на латынь – ретикулум, что и дало название этим клеткам. Возможны также включения, похожие на песок или зерна, глыбы, клубок, венчик.

В настоящее время для анализа крови применяется автоматический подсчет, он называется метод проточной цитометрии. Клеточные элементы перемещаются в узком капилляре (пробирка с очень маленьким просветом), а их в это время просвечивают лучами лазера. Гематологический анализатор сам определяет процент ретикулоцитов.

Образование ретикулоцитов

Ретикулоциты при анемии

При анемии важно знать уровень ретикулоцитов, так как от этого зависит, есть ли в костном мозге резерв для пополнения недостатка эритроцитов. Если их мало, то это означает, что можно не рассчитывать, что организм самостоятельно восстановит состав крови, и необходимо вводить клетки извне (эритроцитарная масса), стимулировать образование эритропоэтином

Мнение эксперта

Алена Арико

Эксперт в области кардиологии

При повышенном количестве (процент ретикулоцитов выше нормы) в организме должна быть обнаружена явная или скрытая потеря крови, массивное разрушение красных кровяных телец (гемолиз) токсическим веществом, аутоиммунным воспалением. Если эти причины исключены, то необходимо искать опухолевый процесс.

В зависимости от функции костного мозга все анемии делят на:

  • арегенераторные – кроветворение угнетено из-за врожденной апластической анемии или под действием ядовитых веществ, противоопухолевых средств, облучения, вируса, опухоли, ретикулоциты отсутствуют полностью;
  • гипорегенераторные – возникают из-за выраженного дефицита витаминов, железа, (фолиеводефицитная, железодефицитная, в12-дефицитная), ретикулоциты до 0,5%;
  • норморегенераторные – ретикулоциты в норме 0,5-2%, а недостаток эритроцитов вызван потерей крови (геморрагическая анемия);
  • гиперрегенераторные — содержание ретикулоцитов превышает 2%, чаще появляется при разрушении клеток (гемолитическая анемия).

Коррекция

Консервативная терапия

Методов прямого снижения числа ретикулоцитов не существует. Чтобы скорректировать ретикулоцитоз, необходимо устранить его причину, что подразумевает лечение основной патологии. Ретикулоцитоз, возникший через несколько дней после начала применения препаратов витамина В12 или железа – это нормальное явление, не требующее вмешательства. В случае патологического увеличения показателя в зависимости от причины назначается следующее лечение:

  • Гемотрансфузии. При обширных кровотечениях или массивном гемолизе, приводящих к тяжелой анемии (гемоглобин ниже 50 г/л) требуются переливания цельной крови либо ее компонентов (эритроцитарной массы, отмытых эритроцитов, тромботического концентрата). Для остановки кровотечений, вызванных нарушением свертывающей функции крови, эффективно переливание свежезамороженной плазмы, протромбинового комплекса или криопреципитата.
  • Предупреждение гемолиза. Лечение и профилактика гемолитических анемий проводится глюкокортикостероидами (преднизолон), препаратами фолиевой кислоты, внутривенным введением человеческого иммуноглобулина. В тяжелых случаях используются иммуносупрессанты – гидроксимочевина, циклоспорин.
  • Лечение онкогематологических болезней. Для лечения эритробластного лейкоза назначаются курсы химиотерапевтических средств (даунорубицин, винкристин). С целью подавления аномального гемопоэза у пациентов с истинной полицитемией применяют препараты интерферона-альфа, бусульфан, руксолитиниб.

Хирургическое лечение

Массивные непрекращающиеся кровотечения требуют хирургического вмешательства – перевязки, клипирования сосудов, эндоскопического гемостаза (электро-, крио- или лазерокоагуляции). Основное лечение многих гемолитических анемий (наследственного микросфероцитоза, серповидно-клеточной анемии, талассемий) предполагает удаление селезенки (спленэктомию). За 2 недели до операции необходимо проведение вакцинации от пневмококка, менингококка, гемофильной палочки. Если консервативное лечение эритробластного лейкоза оказалось неэффективным, выполняется трансплантация гемопоэтических стволовых клеток.

Ретикулоциты, что это такое

эритроцитов

Что такое ретикулоциты в анализе крови

В норме, ретикулоциты в определенном количестве выявляются и в крови, и в костном мозге. Их число служит прямым отображением качества эритропоэза (образования эритроцитов).

Справочно. Будучи юными предшественниками зрелых эритроцитарных клеток, после образования в костном мозге и выхода в кровь, они находятся в ней около двух суток, трансформируясь в зрелые формы. Процесс их созревания происходит под контролем эритропоэтина (гормон, вырабатываемый почками). Часть ретикулоцитов превращается в эритроциты прямо в костном мозге (КМ).

Ретикулоциты в крови – функции

   RET способны выполнять ту же функцию, что и эритроцитарные клетки – доставлять кислород к органам и тканям. Однако они не могут полноценно замещать зрелые формы. По сути, активная выработка ретикулоцитов – это ответ костного мозга на дефицит эритроцитарной массы и потребность тканей в кислороде.

При гемолитических анемиях, число ретикулоцитов в крови может превышать 60%, а иногда и полностью замещать зрелые формы, так как все эритроциты разрушаются. При резком усилении эритропоэза, в анализе крови будут обнаруживаться также и нормобласты (клетки, трансформирующиеся в ретикулоциты).

При железодефицитной анемии, во время лечения железосодержащими препаратами, ретикулоциты повышены в норме. Подобный ретикулоцитоз свидетельствует о нормальной регенераторной способности КМ и адекватном лечении, не требующем коррекции. Это связано с тем, что ретикулоциты в крови повышаются раньше эритроцитов (так как являются их предшественниками).

То есть основная функция ретикулоцитов заключается в восполнении дефицита эритроцитарной массы.

Внимание! Уменьшения количества ретикулоцитов может свидетельствовать об истощении регенераторных способностей, либо о поражении КМ.

Диагностика

Существуют определенные показания для выполнения анализа на ретикулоциты:

  • Необходимость оценки эритропоэза при гемолизе или кровотечениях.

  • Оценка работоспособности костного мозга к восстановлению после похождения пациентом лечения цитостатиками или после операции по трансплантации этого органа.

  • Оценка возможностей выработки эритропоэтина у пациентов, перенесших операцию по пересадки почки.

  • Прохождение допинг-контроля людьми, профессионально занимающимися спортом.

  • Диагностика анемии, независимо от ее причины.

  • Поиск причин, приводящих к снижению уровня эритроцитов.

  • Поиск причин, которые приводят к недостаточности функции кроветворения костного мозга.

  • Поиск причин, которые приводят к нарушению регенеративной способности органов кроветворения во время прохождения лечения анемии. Оценка эффективности проводимого лечения анемии.

  • Оценка эффективности проводимой терапии с использованием эритропоэтина или эритросупрессоров.

Подсчет ретикулоцитов проводится в клиническом анализе крови. Появление ретикулоцитоза требует обращения к врачу для обследования с целью выяснения причины. В первую очередь должна быть исключена хроническая кровопотеря. Для этого специалист осматривает кожные покровы и слизистые оболочки на предмет бледности, измеряет артериальное давление и частоту сердечных сокращений. Затем назначается дополнительное обследование, включающее:

  • Лабораторные анализы. Измеряется концентрация гемоглобина, других форменных элементов (эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов), цветной показатель. Изучается мазок для обнаружения патологических форм эритроцитов (серповидных, сфероцитарных, шизоцитов). При гемолитических анемиях отмечаются признаки гемолиза – повышение уровня непрямого билирубина и лактатдегидрогеназы, снижение гаптоглобина. Проверяется содержание железа, ферритина. Осуществляется анализ кала на скрытую кровь.
  • Специфическая диагностика гемолитических анемий. Для определения нозологической формы гемолитической анемии проводятся различные тесты. Выполняются иммунологические реакции (антиглобулиновая проба Кумбса), электрофорез гемоглобина и мембранных белков, проточная цитометрия, тесты на осмотическую резистентность эритроцитов.
  • Инструментальные исследования. Для поиска источника кровотечения назначают ректороманоскопию, эзофагогастродуоденоскопию, колоноскопию. При подозрении на кровоизлияние в брюшную полость проводят УЗИ или компьютерную томографию. Для диагностики заболевания легких и сердца производят рентгенографию грудной клетки, спирометрию, эхокардиографию.
  • Гистологические исследования. Для подтверждения злокачественных болезней крови необходимо изучение морфологической картины костного мозга. При полицитемии в биоптате отмечается ярко выраженная гиперплазия всех ростков кроветворения (эритроидного, гранулоцитарного, мегакариоцитарного). Для эритробластного лейкоза характерно преобладание атипичных эритробластов (до 90%) над другими клетками.

Фракция незрелых ретикулоцитов

Индекс, или фракция незрелых ретикулоцитов, определяется процентом юных клеток ко всему количеству. Эти молодые формы крупнее обычных и содержат больше нуклеиновых кислот. При активизации костномозгового кроветворения число незрелых ретикулоцитов возрастает, а при подавлении – снижается. Такая углубленная диагностика нужна при:

  • пересадке костного мозга, почки;
  • лечении противоопухолевыми препаратами;
  • введении эритропоэтина или витаминов, железа;
  • выявлении скрытой потери крови или оценки остановки внутреннего кровотечения;
  • исследовании степени активности аутоиммунного процесса (образование антител к своим клеткам) с разрушением эритроцитов.

Рейтинг автора
5
Материал подготовил
Максим Иванов
Наш эксперт
Написано статей
129
Ссылка на основную публикацию
Похожие публикации